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2025-03-21 09:09:27  閱讀 59 次 評論 0 條

AAV在眼部注射方法有哪些

肺部注射包括鼻內(nèi)滴注法和氣管插管術(shù)。鼻內(nèi)滴注法操作簡單,直接將病毒懸液滴入鼻腔,但顆??赡艹练e在上呼吸道,需要較大劑量的病毒。氣管插管術(shù)能將病毒載體直接輸入肺部,避免上呼吸道損失,但需特殊設(shè)備和技巧。此外,還有氣管內(nèi)注射,操作與鼻內(nèi)滴注法類似,但直接注入氣管。

然而,基于AAV載體的基因治療通常采用視網(wǎng)膜下腔注射,要求高技能操作,增加視網(wǎng)膜脫離風(fēng)險(xiǎn),并受限于橫向擴(kuò)散能力,只能感染注射中心附近一小部分視網(wǎng)膜細(xì)胞。玻璃體腔注射避免了這些問題,是一種常用的安全、簡便的遞送方式。但缺乏高效且特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)視網(wǎng)膜細(xì)胞的AAV載體。

然而,基于AAV載體的眼病基因治療通常需要視網(wǎng)膜下腔注射,這需要經(jīng)驗(yàn)豐富的專家進(jìn)行,增加視網(wǎng)膜脫離的風(fēng)險(xiǎn)。AAV橫向擴(kuò)散能力有限,只能感染注射中心附近的一部分視網(wǎng)膜細(xì)胞。玻璃體腔注射能避免這些問題,是一種常用、安全、操作簡單的遞送方式。

) 麻醉小鼠,確保其對疼痛刺激無反應(yīng)。2) 保護(hù)小鼠眼睛,保持濕潤并抑制眨眼反射。3) 保持小鼠體溫,防止麻醉后過低。4) 清潔小鼠耳朵,并消毒。5) 打開鼓室大皰,暴露鐙骨動脈和圓窗膜。6) 輕輕在圓窗膜中心穿刺,觀察液體流出。7) 將0.6~2μL的AAV載體注射至耳蝸鼓階。

心血管系統(tǒng)研究中常用的注射方式包括尾靜脈注射、心肌定點(diǎn)注射、心包內(nèi)注射和血管夾閉注射等。每種方法都有其特點(diǎn)和適應(yīng)范圍。例如,心肌定點(diǎn)注射需要對操作過程有嚴(yán)格控制,確保病毒載體能夠精準(zhǔn)送達(dá)心肌細(xì)胞。心包內(nèi)注射則通過直接將病毒注入心包腔內(nèi),實(shí)現(xiàn)對心臟組織的靶向感染。

心肌注射通過直接注入心臟組織,實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)導(dǎo),但表達(dá)不均勻;尾靜脈注射操作簡便,但特異性較弱,需較高病毒滴度;頸靜脈注射需手術(shù)操作,對動物有傷害性;冠狀動脈注射,尤其是逆向冠狀動脈注射,能實(shí)現(xiàn)微創(chuàng)遞送,但在內(nèi)皮細(xì)胞屏障下,轉(zhuǎn)導(dǎo)效率相對較低。

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