AAV在眼部注射方法有哪些
1、肺部注射包括鼻內(nèi)滴注法和氣管插管術(shù)。鼻內(nèi)滴注法操作簡(jiǎn)單,直接將病毒懸液滴入鼻腔,但顆粒可能沉積在上呼吸道,需要較大劑量的病毒。氣管插管術(shù)能將病毒載體直接輸入肺部,避免上呼吸道損失,但需特殊設(shè)備和技巧。此外,還有氣管內(nèi)注射,操作與鼻內(nèi)滴注法類似,但直接注入氣管。
2、然而,基于AAV載體的基因治療通常采用視網(wǎng)膜下腔注射,要求高技能操作,增加視網(wǎng)膜脫離風(fēng)險(xiǎn),并受限于橫向擴(kuò)散能力,只能感染注射中心附近一小部分視網(wǎng)膜細(xì)胞。玻璃體腔注射避免了這些問(wèn)題,是一種常用的安全、簡(jiǎn)便的遞送方式。但缺乏高效且特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)視網(wǎng)膜細(xì)胞的AAV載體。
3、但具體操作與結(jié)果解讀存在差異。通過(guò)一款LVV眼用注射液對(duì)比兩種方法,結(jié)果顯示,光阻法檢測(cè)出的微粒數(shù)量遠(yuǎn)高于顯微計(jì)數(shù)法。光阻法在檢測(cè)過(guò)程中容易引入假陽(yáng)性結(jié)果,主要由于樣品制備過(guò)程中可能產(chǎn)生的氣泡與少量硅油干擾,導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果不符合規(guī)定。
4、視網(wǎng)膜下腔注射適用于RPE細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo),主要步驟包括麻醉、切口制作、插入注射針、開(kāi)始注射、緩慢出針,以及避免切口處感染等。此方法可避免觸發(fā)體液免疫反應(yīng),對(duì)另一只眼再次視網(wǎng)膜下注射無(wú)影響。在選擇注射方式時(shí),應(yīng)考慮疾病的性質(zhì),同時(shí)選擇對(duì)小鼠最便利的方式。
5、然而,基于AAV載體的眼病基因治療通常需要視網(wǎng)膜下腔注射,這需要經(jīng)驗(yàn)豐富的專家進(jìn)行,增加視網(wǎng)膜脫離的風(fēng)險(xiǎn)。AAV橫向擴(kuò)散能力有限,只能感染注射中心附近的一部分視網(wǎng)膜細(xì)胞。玻璃體腔注射能避免這些問(wèn)題,是一種常用、安全、操作簡(jiǎn)單的遞送方式。
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